科研時節(jié)忙碌紛紛 ELISA準(zhǔn)確性這樣驗(yàn)證

    本學(xué)期就要結(jié)束了，科研時節(jié)忙碌紛紛，不少客戶們正在準(zhǔn)備即將開始的實(shí)驗(yàn)與春節(jié)后的試劑盒預(yù)購。ELISA實(shí)驗(yàn)得以大家的喜愛是因?yàn)槠溆兄哽`敏、高特異性、準(zhǔn)確性好等特點(diǎn)。

    近日，我公司何在售后服務(wù)問題處理過程中，接到了曹老師的，曹老師說：“ELISA方法的準(zhǔn)確性一般會用LC、LC-MS或者LC-MSMS做驗(yàn)證，因?yàn)槲业姆椒ㄉ婕暗叫》肿铀幬锏难苌鷾y定，所以液相的方法達(dá)不到回收率，請問有沒有其他的方法可以用來驗(yàn)證ELISA方法的準(zhǔn)確性呢？有沒有這種可能是我的藥物衍生體系本身這種方法與液相的流動相沖突，不適合用液相去測定？"

    對曹老師的疑問，上海恒遠(yuǎn)技術(shù)專員做出的細(xì)致的分析：

    通常用ELISA方法檢驗(yàn)出來的陽性樣品，需要用LC、LC-MS、GC-MS或者LC-MSMS做確證，因?yàn)镋LISA方法的存在約5%左右的假陽性。究竟用上述的哪一種方法去確證其準(zhǔn)確性，是要根據(jù)被測組分的理化性質(zhì)決定的，例如組分在300度也不能夠汽化，肯定不能用GC-MS；組分結(jié)構(gòu)中有共軛，存在 n→π躍遷,π→π躍遷，一般會用HPLC紫外檢測器；若組分具有熒光或者通過衍生化反應(yīng)可以定量產(chǎn)生具有熒光的物質(zhì)，則會用HPLC熒光檢測器。以此類推，究竟用什么方法確證取決于被測組分的理化性質(zhì)，而不是憑空想象。