GIBCO，DMEM/F-12血清

一、GIBCO，DMEM/F-12血清概述

    采用正常人血液為原料，經無菌采集、分離、微孔過濾后而成。本產品無支原體、無病毒、無噬毒體、內毒素含量低于1EU/ml，適用于細胞、組織器官培養、細胞株保藏、單抗研制，是醫院、科研院校、動物疫苗、生物制藥廠家重要培養基之一。

主要成分分析
    由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學成分組成,這些化學成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
二、注意事項
1、如何解凍血清才不會使產品質量受損？
    將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8C冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規則地搖晃均勻如何避免沉淀物的產生?
解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。C至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20。C至37。C)，實驗顯示非常容易產生沉淀物。
2、解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發生
3、請勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質量。
4、保存方法
    血清應保存在-5C至-2OC。然而，若存放于4C時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議將無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。
三、操作問題
如何避免沉淀物的產生?
1、解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。C至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20。C至37。C)，實驗顯示非常容易產生沉淀物。
2、解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發生
3、請勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質量。
4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。
5、若必須做血清的熱滅活，請遵守56。C，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現，該如何處理?　欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養基內一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞過濾膜。

四、操作流程
采 血：胎牛血清采用心臟穿刺的方法采血。馬血清采自供體動物。新生牛血清采自出生10至14天的小牛。全部按照工業標準采血。
處 理：
全部血清：收集的血液均在冷藏條件下處理。血清和凝塊分離后立即將血清合并并冷凍。只有符合我們的檢測標準的血清才被接受作進一步處理。
熱滅活血清：熱滅活是在56℃水浴中嚴格控溫30分鐘。
操作實驗中，血清有必要做熱滅活嗎?
實驗顯示，經過正確處理的熱滅活血清，對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量，而造成細胞生長速率的
降低。而經過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察，像是"小黑點"，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37C環境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。因此我們建議您，若非必須，您可以不需要做熱處理這一步。如此一來，不但節省您寶貴的時間，更確保您血清的質量!

另外，購買已滅活成品也不失一個捷徑，請在購買的時候注意詢問廠家是否是已滅活血清要作用
解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。C至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20。C至37。C)，實驗顯示非常容易產生沉淀物。
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